Эцио Аудиторе да Фиренце являлся ассасином эпохи Ренессанса, впоследствии ставшим мастером-предводителем Братства в Италии. Родился 24 июня 1459 года и являлся предком других главных героев серии: Дезмонда Майлса и Объекта 16 (Клея Качмарека). Эцио не подозревал о своей дальнейшей судьбе вплоть до достижения семнадцатилетнего возраста, но заговор против семьи Аудиторе и дальнейшее наказание в виде повешения его отца и двух братьев сделали своё дело: протагонист смог узнать своё предназначение, нашёл начальное обмундирование в ящике и вышел на тропу долгой и кровопролитной вендетты. Собственно, с этого и начинаются основные события игры Assassin's Creed II — предыдущие задания же можно считать простым предисловием, важным для понимания сюжетной линии. Дабы уберечь свою сестру и мать, Эцио решил сменить место жительства на более спокойное и тихое, в конечном счёте остановившись на вилле Монтериджони у своего дяди Марио Аудиторе. Это оказало положительный эффект на подготовку главного героя: дядя смог научить его всему, что знал сам, включая атакующие и оборонительные приёмы. За свою насыщенную жизнь Эцио Аудиторе да Фиренце удалось расправиться со всеми участвующими в заговоре людьми, вместе с тем освободив большие территории Италии и Рима, прежде находившиеся под управлением тамплиеров. Ему также удалось познакомиться со многими выдающимися людьми своего времени, включая Лоренцо Медичи, Леонардо да Винчи, Родриго Борджиа, Никколо Макиавелли, Катерину Сфорца, Сулеймана I Великолепного, Селима I Грозного и других, не менее колоритных личностей. Последним же заданием главного героя являлось открытие библиотеки Альтаира ибн Ла-Ахада, узнать тайны которой можно было лишь с помощью специальных дисков, на которых записаны воспоминания. В процессе их нахождения протагонист знакомится со своей будущей женой, Софией Сартор, также оказавшей большую помощь в поисках необходимых ключей. В итоге, Эцио Аудиторе да Фиренце таки удалось открыть кладовую знаний ассассинов и обнаружить там скелет Альтаира и еще один артефакт «Яблоко Эдема». В 1524 году Эцио вышел на пенсию и жил во Флоренции, у него появилась дочь Флавия, а чуть позже сын Марчелло. Последние годы своей жизни Эцио провёл в тихой и умиротворённой обстановке в окружении семьи. Умер главный герой на площади перед собором Санта-Мария-дель-Фьоре во Флоренции, неподалеку от места, где когда-то были повешены его отец и братья. В последний день своей жизни Эцио вместе с Софией и Флавией идет на рынок за продуктами. Эцио вдруг становится плохо, он понял, что это конец, последний раз взглянул на свою семью, улыбнулся и умер..

В течение игры «Assassin’s Creed II» Эцио учится навыкам ассасина: фехтованию на мечах и метанию ножей. Один из главных навыков — акробатическое передвижение по городским зданиям, что напоминает современный паркур. Кроме передвижения пешком, Эцио умеет плавать, скакать на лошади и летать, используя «летательную машину» Леонардо да Винчи. Кроме того, у Эцио имеется особая способность, свойственная лишь немногим из ассасинов — «Орлиное Зрение». С возрастом эта способность совершенствуется и развивается (пример: «Орлиное чувство»).

“Когда я был молод, у меня были свобода, время и любовь, которых я не видел, не знал и не чувствовал. Тридцать долгих лет прошло, прежде чем я постиг смысл этих слов. И сейчас, на закате лет, он ясен мне как никогда. Любовь, свобода, время, которые я когда-то не ценил, теперь придают мне сил двигаться вперед — особенно любовь, дорогая. К тебе, нашим детям, братьям и сестрам, и огромному, непостижимому миру, что дал нам жизнь и наполнил ее смыслом. Я люблю тебя, моя София. Навеки твой,Эцио Аудиторе."